Elisa試劑盒運用雙抗體夾心法測定標本中大白鼠類風濕因子(RF)水平。用純化的大白鼠類風濕因子(RF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中順次加入類風濕因子(RF)，再與 HRP 符號的類風濕因子(RF)抗體結合，構成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗刷后加底物 TMB 顯。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍，并在酸的效果下轉化成終究的黃。彩的深淺和樣品中的類風濕因子(RF)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），經過規范曲線計算樣品中大白鼠類風濕因子(RF)濃度。

Elisa試劑盒注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可運用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗刷液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響成果。

3．各步加樣均應運用加樣器，并常常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內，如標本數量多，推薦運用排槍加樣。

4． elisa試劑盒請每次測定的同時做規范曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD 值大于規范品孔孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數（n 倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。