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ELISA試劑盒的實驗結(jié)果

2025-01-21 [880]

        ELISA試劑盒實驗過程中,操作過程中有一些易被人們忽視小細(xì)節(jié),但這些小細(xì)節(jié)卻對試驗結(jié)果會產(chǎn)生直接影響。以下是ELISA試劑盒控制操作過程的九點要素:

一、嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。

二、加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗。

三、封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。

四、用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。

五、合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

六、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。

七、顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

八、加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

九、應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔,整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。

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